过氧化氢浓度测定,很多人都不知道如何测定过氧化氢浓度的方法,下面让小编来介绍一些测定过氧化氢的方法以及背后的原理是什么?
过氧化氢浓度测定
过氧化氢是什么呢?
过氧化氢又名双氧水,是一种常用的氧化剂,可以用于漂白和消毒,过氧化氢的分子式:H202过氧化氢的分子量:34,纯净的过氧化氢是一种无色粘稠的液体,过氧化氢呈弱酸性反应。过氧化氢的比重在25摄氏度时是1.4425,过氧化氢熔点是零下0.43摄氏度,过氧化氢的沸点150.2摄氏度,过氧化氢可以溶于水、乙醇、乙醚,不溶于石油醚,能与水以任何比例相混。其次高浓度的过氧化氢能燃烧,过氧化氢与MnO2相互作用则发生爆炸。过氧化氢如果沾于皮肤上即发生白色斑点,经过短时期的发烧和发痒后,再过数小时斑点才能消失。
过氧化氢浓度测定方法如下:
一、二甲酚橙(xylenol orange)法
原理:过氧化氢氧化二价铁离子产生三价铁离子,二甲酚橙(xylenol orange)高选择性的结合三价铁离子形成有色(紫色)产物,可用比色法在580nm处测定。从而实现对过氧化氢浓度的测定。由于二甲酚橙(xylenol orange)作为一种金属离子络合指示剂,与三价铁离子的结合有很高的选择性,也就是该方法有很好的特异性。同时该反应需要在酸性条件下进行,可以消除很多物质的干扰。
二、硫酸钛比色法
原理:H2O2与硫酸钛生成黄色的过氧化钛复合物,在415nm有特征吸收。该方法原理简单易懂,但样本处理需要自备丙酮用来破碎细胞、匀浆组织和稀释液体样本。丙酮易挥发,而且易燃有毒,给操作带来一定困难,需要做好防护措施。
三、探针法
原理:在辣根过氧化物酶(HRP)存在的条件下,特异的 探针与过氧化氢反应,生成有色产物在570nm有最大光吸收,也可产生红色荧光(Ex/Em=535/587 nm)。比色法与荧光法灵敏度不同,需要配制不同的标准曲线。该方法需要用到特异性的荧光探针,反应原理较前面2种复杂,但灵敏度很高,在荧光法中灵敏度可达40 nM。
四、过氧化物酶底物法
原理:用一种独特的过氧化物酶底物测定溶液和细胞提取物中的过氧化氢 ,在辣根过氧化物酶(HRP)存在的条件下,过氧化氢氧化无色的过氧化物酶底物,产生强烈的蓝色。在 650nm有特征吸收。
过氧化氢浓度测定,以上就是小编整理的全部内容了。过氧化氢作为一种化学物质,高浓度的过氧化氢能燃烧,易发生爆炸,在实际测定中要非常小心。